試管嬰兒技術每年為全世界數十萬的不孕不育夫婦帶來福音。常規試管嬰兒技術分為幾個步驟:獲取卵子、采集精子、體外受精、胚胎培養、胚胎移植。體外受精失敗或受精率低,不僅會降低卵子的利用率,減少可移植胚胎的數量,嚴重時甚至無可移植胚胎而被迫取消,增加患者的心理及經濟負擔。
一、常規體外受精的現狀
體外受精是精子和卵子在體外完成受精過程的技術,根據精卵孵育時間主要分為長時授精和短時授精。
長時授精是精子與卵子在受精液中共同孵育16-18h(即過夜受精)后,拆除卵子外周顆粒細胞觀察原核,判斷受精情況。此時如果發現卵子不受精或受精率低(<30%),對其進行補救性卵胞漿內單精子注射(ICSI),稱為晚補救。但這種補救往往因為卵子在體外時間過久發生老化,從而影響補救的受精率和胚胎發育潛能,導致臨床結局不佳。
短時授精是指IVF授精4-6小時后,去除卵子周圍的顆粒細胞,觀察第二極體排出,預測受精情況。第二極體的排出是判斷卵子受精最早的標志。但是每個卵子第二極體排出時間并不完全一致,也有些卵子的第一極體有破碎或異常,這就導致判斷存在一定的困難,依賴胚胎師的經驗。此時通過判斷,卵子不受精或受精率低,就對其進行補救性ICSI,稱為早補救。目前,國內大多數生殖中心都采用短時授精結合早補救ICSI的方法,以期減少受精失敗,增加患者妊娠機會。
雙原核受精卵
二、補救ICSI的時間選擇
補救ICSI時間的選擇至關重要,不僅要在該時間段內觀察到是否有第二極體釋放,又需要卵子盡量處于最佳受精時間窗。有學者研究表明授精后4-8h觀察到受精失敗,并對受精失敗卵子實施早期補救ICSI技術,其受精率高于8.1-12h和18-20h后的補救。
卵胞漿內單精子注射(ICSI)
三、IVF受精失敗因素淺析
IVF受精失敗并不能簡單的認為卵子異常,原因比較復雜。
首先是精子進入卵子的過程出現問題,卵子透明帶異常,精子穿透困難是受精失敗最常見的原因。另外基因缺陷,精卵識別障礙,也會導致受精失敗。各種原因導致的精子不能進入卵子內,運用ICSI技術基本上能解決受精問題。
其次卵子成熟度不足也是受精率低下或者完全受精失敗的重要原因之一,卵子的成熟需要細胞核和細胞質的同步成熟。取卵后如果發現大部分卵細胞核不成熟,通常胚胎師會建議追加行卵子體外成熟(IVM)培養數小時,等待卵子成熟后再行ICSI授精。卵子胞質成熟不全通常在形態上無法判斷,但細胞胞漿因蛋白合成不全或信息傳導異常,可能影響到皮質顆粒釋放,不能有效的阻止多余精子進入卵子,可能形成多精受精;反之,如果皮質反應過早出現,也可以導致IVF不受精。通常建議下周期調整促排卵方案。
總結
據報道,多數生殖中心的常規IVF受精率為60%~70%,而受精完全失敗周期的發生率約占5%。短時授精及補救ICSI的應用,有效減少了體外受精失敗或低受精率的發生,降低了因無可移植胚胎而導致的周期取消率,改善了這部分人群的臨床妊娠結局。
判斷短時授精是否需要補救與胚胎師的經驗息息相關,如何在最佳時間內行補救ICSI,同時又避免因判斷失誤導致多精受精,這種權衡是最考驗胚胎師的技能之一。每天在明月當空時,胚胎師輪班等在胚胎室,在為您的精卵結合盡最大努力。